BD Rhapsody: 單細胞分析工作流程

1. BD Rhapsody 核心(xin)技術之微孔板

一(yi)個(ge)微孔 =   一(yi)個(ge)單細胞 + 一(yi)個(ge)磁(ci)珠

BD Rhapsody Express單細胞分析系統提供的單細胞分割，以微孔為基礎，功能強大。
●   限度一套臺式設備，沒有(you)射流(liu)泵
●   當細胞在重力(li)作(zuo)用下(xia)沉入(ru)微孔時，可(ke)以對(dui)其進行(xing)溫和的處理
●   每個BD Rhapsody微孔板(ban)均包括一個超過(guo)22萬個分區的(de)微孔陣(zhen)列
●   BD Rhapsody"微孔(kong)板體(ti)積約為600μL，稀釋細胞懸(xuan)浮液可直接裝入微孔(kong)板，無(wu)需將其濃縮到非常小的體(ti)積
●   由于沒有微流通道(dao)，因此不需(xu)要(yao)擔心通道(dao)堵(du)塞的問(wen)題
●   微孔經過特(te)殊處理(li)，以防(fang)止細胞粘附在表(biao)面，并進(jin)行深入的質量控制(zhi)

Rhapsody利用微孔進行單細(xi)胞分離，屬于Microwell-seq。 20萬(wan)個(ge)微孔的(de)尺寸被設計成(cheng)一(yi)(yi)(yi)個(ge)微孔恰好可(ke)以容納一(yi)(yi)(yi)個(ge)bead+一(yi)(yi)(yi)個(ge)細(xi)胞。

2. BD Rhapsody核心技術之(zhi)Barcoded Bead

3. 單(dan)細胞文庫制(zhi)備(bei)及測序

Single cell isolation and capture流(liu)程圖

4. BD Rhapsody技術(shu)優勢

成本更低(di)—— 靶向基因檢(jian)測(ce)，避免看家基因占用的(de)大(da)量測(ce)序(xu)(xu)數(shu)據，大(da)大(da)節省了測(ce)序(xu)(xu)和分析成本。

超高細(xi)胞捕獲效(xiao)率(lv)—— 有(you)效(xiao)細(xi)胞捕獲率(lv)60%，遠高于市場上目前所有(you)大通量單細(xi)胞轉錄組測序(xu)技術。

罕(han)見轉(zhuan)錄本，更高(gao)檢出率—— 靶向定(ding)(ding)制panel，選定(ding)(ding)特定(ding)(ding)基因(yin)組合(he)，提高(gao)UMI計(ji)數效(xiao)率，罕(han)見轉(zhuan)錄本檢測閾值更低。

克服PCR，擴(kuo)增(zeng)偏差——引入單(dan)細胞測序金標(biao)準，BD分子(zi)標(biao)簽，降低非(fei)特異(yi)性表達。

實(shi)理更高的(de)分辨率——可以分辨更精細、微(wei)觀的(de)細胞群和細胞亞種(zhong)群。

反轉錄的磁珠，超常穩(wen)存(cun)儲——完整(zheng)cDNA可在(zai)磁珠微(wei)球結(jie)構保(bao)存(cun)長3月(4度)，隨(sui)用隨(sui)取。

靈活(huo)分樣組合——提高(gao)(gao)樣品通量(liang)（最多可(ke)(ke)12個樣本(ben)(ben)同時(shi)建(jian)庫，可(ke)(ke)等分，可(ke)(ke)隨機組合）；又可(ke)(ke)以(yi)同時(shi)進行單細(xi)胞(bao)蛋(dan)白和轉錄(lu)組聯合檢測，大大降低成本(ben)(ben)的(de)同時(shi)，也(ye)為單細(xi)胞(bao)多組學研究提供(gong)了更高(gao)(gao)效的(de)平臺。

5. BD Rhapsody產品(pin)線overview